edta,肝素

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edta,肝素(一)
常用抗凝剂的配制和使用

常用抗凝剂的配制及用法

在医学实验中常需动物的全身抗凝,采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。对抗凝剂的要求是:用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。

一、肝素

(1)肝素抗凝作用原理

肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂,肝素的抗凝作用主要

是抑制凝血致活酶的活力,阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用,从而使血液不发生凝固。剂! 注意事项:做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素!因为肝素是聚合酶链式反应的抑制

(2)配制和用量

纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U,10~20U能抗1 ml血液计)。但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等,因而其抗凝效果也不相同。一般可配成1%肝素生理盐溶液,用时取0.1毫升于试管内,100℃烘干,每管能抗凝5~10ml血液。也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁,直接抽血至注射器内而使血液不凝。在动物实验作全身抗凝

时,一般剂量为:大白鼠2.5~3.0mg/200~300g体质量,兔10mg/kg体质量,狗5~10mg/kg体质量。肝素可改变蛋白质等电点,因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时,不可采用肝素。市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U,相当于100mg。

二、草酸盐合剂

(1)原理

草酸胺能使血细胞略为膨大,而草酸钾能使血细胞微缩小,因此草酸铵与草酸钾按3:2比例配臵,可使血细胞体积保持不变;加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。【edta,肝素】

(2)配制方法及用量

草酸铵1.2g、草酸钾0.8g、福尔马林1.0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0.1ml(即相当草酸铵1.2mg,草酸钾0.8mg)。根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。如取0.5ml于试管,烘干后每管可使5ml血不凝固。

(3)注意事项

草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子,而达到抗凝目的。用时注意加的量应适中,不能过多,以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。不适用于血液内钙或钾的测定,也不能用于血液非蛋白氮测定。

三、枸櫞酸钠

常配成3~5%水溶液。也可直接加粉剂,每毫升血加3~5mg,即可达到抗凝目的。

枸櫞酸钠可使钙失去活性,防止凝血。但其抗凝作用较差,碱性较强,不宜作化学检验之用。仅可用于红细胞沉降速度测定。急性血压测定实验所用枸櫞酸钠为5~6%溶液。

四、草酸钾

(一)原理和注意事项

草酸钾为最常用的抗凝剂。其与血液混合后可迅速与血液中的钙离子结合,形成不溶解的草

酸钙,使血液不凝固。常用于非蛋白氮测定,但不适用于测定钾和钙。草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶的活性,故应注意。

(二)配制及使用方法

取草酸钾10g,加蒸馏水少许使溶解,再加蒸馏水至100ml。配制成10%水溶液,如每管加0.1ml则可使5~10ml血不凝。一般如作微量检验,用血量较少,可配制成2%溶液,如每管加0.1ml可使1~2ml血液不凝。

五、乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)

EDTA对血液中钙离子有很大的亲和力,能与钙离子络合而使血液抗凝。每0.8mg可抗凝1ml血液。除不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外,适用于多种抗凝。

用) 六、(酸性)柠檬酸葡萄糖溶液B(ACD)(用于新鲜抽提或者是冻存的血样品,实验室常

柠檬酸钠:1.32%(M/V)

柠檬酸:0.48%(M/V)

葡萄糖:1.47%(M/V)

ACD抗凝剂为:柠檬酸0.48g、柠檬酸钠1.32g、葡萄糖1.47g,加水至100ml,灭菌后备用

一般20ML新鲜血液中加入3.5ML ACD抗凝剂。比例依次类推!!

血液可以在0度条件下保存数天,或者是零下70度条件下无限期保存!

剂! 注意事项:做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素!因为肝素是聚合酶链式反应的抑制

从全血中制备基因组DNA,ACD做为抗凝剂要优于EDTA,因为他更加能保存高分子质量的DNA,然而,血样常常被收集于用定量EDTA作为抗凝剂的小管中。

在大多数美国的医院中,收集血样的小管均用颜色标明是否含有抗凝剂,紫色顶管盖的小管一般含有抗凝剂,通常是EDTA的干粉。黄色顶盖的小管不含抗凝剂。

在分子克隆实验中,前者一般用于收集血样用于制备基因组的DNA,后者用于收集血样作为用EB病毒的永生化淋巴细胞的来源。这些永生化的细胞可以作为可更新的来源来制备大量的DNA以备后用,如进行遗传学的研究等等!

edta,肝素(二)
抗凝剂的使用

几种常用抗凝剂的合理使用

应用物理或化学方法,除掉或抑制血液中的某些凝血因子,阻止血液凝固,称为抗凝。能够阻止血液凝固的化学试剂或物质,称为抗凝剂或抗凝物质。抗凝剂的种类很多,性质各异。因此,必须根据检验目的恰当选择,才能获得预期效果。现将我院临床检验常用抗凝剂的种类及使用方法简介如下。

一、枸橼酸钠:枸橼酸钠可与血液中钙离子形成可溶性螯合物从而阻止血液凝固。常用于临床检验中凝血象的检查,其使用浓度为109mmol/l,例如我实验室APTT、PT的检查,抗凝剂与血液比例为1:9。也用于血沉的测定,抗凝剂与血液比例为1:4。【edta,肝素】

二、乙二胺四乙酸盐(EDTA):EDTA的二钠、二钾和三钾盐,均可与血中钙离子形成螯合物,从而阻止血液凝固。通常配成15g/l水溶液,用于实验室使用。 EDTA盐对血小板形态和血细胞形态影响很小,因此适用于血液常规检查,特别是血小板计数,但影响血小板聚集和白细胞吞噬功能,故不适于做凝血象检查和血小板功能试验。此外,此抗凝剂特别适用于红细胞比积测定,室温放置48小时红细胞体积不变。因此,我实验室EDTA—K2抗凝的全血用于血常规检查。

三、肝素:肝素与抗凝血酶Ⅱ一起,低浓度时抑制凝血因子IXa5、PF3之间的作用,加强抗凝血酶Ⅲ(AT—Ⅲ)灭活丝氨酸蛋白酶,从而阻止凝血酶形成,抑制凝血酶的自我催化及抑制因子Ⅹ的作用。因此,肝素具有抗凝能力强,不影响血细胞体积,不易溶血等优点,是一种较好的抗凝剂。可用于红细胞计数、血红蛋白测定、红细胞比积测定和多种生化分析,也是抗血栓药物之一。但过量肝素可引起白细胞聚集和血小板减少,故不适用于白细胞分类和血小板计数,更不能用于凝血象检查。由于肝素抗凝时间短,久置易失效,价格昂贵,所以凡能使用普通抗凝剂者,一般不用肝素。如用肝素抗凝的血液,就应在短时间内完成检测。我实验室血流变检测和血气分析用肝素作为抗凝剂。

四、草酸钠:草酸钠可与血中钙离子生成草酸钙沉淀,从而阻止血液凝固。草酸钠通常用0.1mmol/l浓度,与血液按1:9比例使用,主要用于凝血象检查。现在我实验室已淘汰。

edta,肝素(三)
常用抗凝剂的配制及用法

在医学实验中常需动物的全身抗凝,采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。对抗凝剂的要求是:用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。

一、肝素

(1)肝素抗凝作用原理

肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂,肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力,阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用,从而使血液不发生凝固。

(2)配制和用量

纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U,10~20U能抗1 ml血液计)。但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等,因而其抗凝效果也不相同。一般可配成1%肝素生理盐溶液,用时取0.1毫升于试管内,100℃烘干,每管能抗凝5~10ml血液。也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁,直接抽血至注射器内而使血液不凝。在动物实验作全身抗凝时,一般剂量为:大白鼠2.5~3.0mg/200~300g体质量,兔10mg/kg体质量,狗5~10mg/kg体质量。肝素可改变蛋白质等电点,因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时,不可采用肝素。市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U,相当于100mg。

二、草酸盐合剂

(1)原理

草酸胺能使血细胞略为膨大,而草酸钾能使血细胞微缩小,因此草酸铵与草酸钾按3:2比例配置,可使血细胞体积保持不变;加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。

(2)配制方法及用量

草酸铵1.2g、草酸钾0.8g、福尔马林1.0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0.1ml(即相当草酸铵1.2mg,草酸钾0.8mg)。根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。如取0.5ml于试管,烘干后每管可使5ml血不凝固。

(3)注意事项

草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子,而达到抗凝目的。用时注意加的量应适中,不能过多,以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。不适用于血液内钙或钾的测定,也不能用于血液非蛋白氮测定。

三、枸櫞酸钠

常配成3~5%水溶液。也可直接加粉剂,每毫升血加3~5mg,即可达到抗凝目的。

枸櫞酸钠可使钙失去活性,防止凝血。但其抗凝作用较差,碱性较强,不宜作化学检验之用。仅可用于红细胞沉降速度测定。急性血压测定实验所用枸櫞酸钠为5~6%溶液。【edta,肝素】

四、草酸钾

(一)原理和注意事项

草酸钾为最常用的抗凝剂。其与血液混合后可迅速与血液中的钙离子结合,形成不溶解的草酸钙,使血液不凝固。常用于非蛋白氮测定,但不适用于测定钾和钙。草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶的活性,故应注意。

(二)配制及使用方法

取草酸钾10g,加蒸馏水少许使溶解,再加蒸馏水至100ml。配制成10%水溶液,如每管加0.1ml则可使5~10ml血不凝。一般如作微量检验,用血量较少,可配制成2%溶液,如每管加0.1ml可使1~2ml血液不凝。

五、乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)

EDTA对血液中钙离子有很大的亲和力,能与钙离子络合而使血液抗凝。每0.8mg可抗凝1ml血液。除不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外,适用于多种抗凝

edta,肝素(四)
26例EDTA依赖性血小板减少症患者的比较分析

  摘要:目的 分析EDTA依赖性血小板减少的现象并推测其原因。方法 对26例EDTA依赖性血小板减少患者重新采血,手工计数血小板(Plt)与白细胞(WBC),并按时间梯度上机检验Plt与WBC的计数变化,同时检验其ESR和免疫球蛋白含量。结果 采血后10 min内,上机检测EDTA抗凝血,,其Plt及WBC计数结果与手工法的差异无统计学意义(P>0.05),采血30 min以后,仪器法计数结果与手工法的差异有统计学意义(P<0.05);对比健康志愿者,EDTA依赖性血小板减少症患者的红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白、IgG及IgM差异有统计学意义(P<0.05)。结论 EDTA依赖性血小板减少症的发生可能与患者的血小板、自身抗体及其他个体因素有关,做血常规检查时遇到Plt计数水平与临床指征不相吻合时,需及时与临床沟通并复查,必要时推片镜检计数,以避免误诊。

  关键词:EDTA依赖性血小板减少;血小板;白细胞;红细胞沉降率;C-反应蛋白
  ICSH建议,临床血常规检查计数全血细胞需用EDTA盐抗凝,肝素、枸橼酸盐等抗凝剂均不适用,因此临床血常规均采用紫帽EDTA抗凝管来采集。EDTA依赖性血小板减少症患者近年来常见报道,其发生已经成为临床Plt计数误诊的最主要因素,正常人群中该现象的发生率为0.09%~0.21%,与免疫系统紊乱密切相关,但具体原因目前尚不明确[1]。本研究对26例EDTA依赖性血小板减少症(EDTA-dependent pseudo thrombocytopenia,EDTA-PTCP)患者的血常规进行分析,讨论其仪器计数的Plt和WBC数量与采样后标本存放时间的关系,同时对其ESR、C-反应蛋白及三个亚型的血清免疫球蛋白含量进行检测。
  1资料与方法
  1.1一般资料 收集2012年9月~2014年6月至我院住院并确认为EDTA-PTCP的患者及我院体检科健康体检者的资料。EDTA-PTCP组(患者组)共26例,其中男l1例,女15例,年龄平均(49±17)岁,健康志愿组共30例,男12例,女l8例,年龄平均(45±16)岁。
  1.2仪器和试剂 SYSMEX-XE5000全自动五分类血细胞分析仪; Beckman Coulter AU2700全自动生化分析仪及IgA、IgG、IgM试剂(伊利康速率散射比浊法);C-反应蛋白试剂(西班牙BioSystems);Olympus公司CHS双目显微镜;血沉仪;EDTA-K2、枸橼酸钠抗凝管;所有仪器均为原装配套试剂,仪器室内质控正常在控,能力验证结果满意。
  1.3方法 抽取26例EDTA-PTCP患者的清晨空腹静脉血,按要求注入EDTA-K2及含分离胶试管。EDTA-K2抗凝管立即混匀后分别于5 min、10 min、30 min、60 min、90 min、l20 min进行仪器法血常规检验。采集患者血液时,所有26例标本分别按《全国临床检验操作规程》进行涂片,通过显微镜镜检,选择有经验的主管检验师计数Plt和WBC含量[2],将其结果作为参考值。ESR及免疫球蛋白含量的检测按对应的SOP文件进行。
  1.4统计学方法 采用SPSS 18.0进行统计分析,t检验比较组间差异,P<0.05为组间差异有统计学意义。
  2结果
  2.1患者组Plt和WBC计数 26例EDTA-PTCP阳性患者在采血后不同时间段对样品进行的仪器法检测Plt和WBC计数见表1,与手工计数相比,5 min与10 min时上机检测EDTA-K2抗凝血的Plt和WBC计数,差异无统计学意义(P>0.05),但30 min及以后的差异逐渐变大(P<0.05)。
  2.2 ESR、C-反应蛋白及免疫球蛋白检测结果 与对照组相比,患者组IgG、IgM、C-反应蛋白及ESR的检验结果明显高于健康对照组,且差异有统计学意义(P<0.05),而IgA的结果,与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),见表2。
  3讨论
  自Onder等报道一例EDTA-PTCP现象后,引起了国内外广泛关注[3]。EDTA-PTCP是由于EDTA抗凝血在全自动血细胞计数仪上检测时,EDTA盐诱导血小板聚集、堆积,从而影响血小板计数,使血小板计数偏低[3]。而EDTA-K2是目前公认的血细胞计数的抗凝剂,已广泛用于临床血常规检测。可以确定,发生EDTA-PTCP的原因之一是在EDTA盐作为抗凝剂的前提下,出现的免疫介导的冷抗血小板自身抗体。究其原因,可能与血小板表面存在的某种隐匿性抗原有关[4]。
  本研究中,随着采血后时间的延长,患者组血小板聚集逐渐加重,仪器法计数血小板含量逐步减少,而白细胞数在血液采集30 min后明显升高,其可能原因就是因为出现了血小板卫星现象,导致血小板计数减少,仪器误认为聚集的血小板为白细胞而导致白细胞计数的增高。在患者组中,血清IgG、IgM的含量相比健康对照组,有较大增高,ESR,CRP也显著高于对照组,因此可以认为,患者血清中的免疫球蛋白成分及水平与EDTA-PTCP现象有一定的相关性。
  血常规是临床检查的最基本项目,临床应用非常广泛。尽管EDTA-PTCP在人群的发生概率很低,但一旦遇到并忽视此类患者,可能造成误诊,给患者及临床诊治工作带来很大困扰。日常工作状态下,采血后10 min进行血常规检验在平常工作中可能较难实现,而超过30 min,血小板计数会减少而白细胞会相对升高,造成检验结果的偏差,甚至出现危急值。因此在日常工作中,检验工作人员必须加强与患者和临床医师的沟通,对无任何出血症状且Plt直方图又发生改变的血小板减少患者,应加强人工推片复检,通过手工法计数血小板和白细胞以排除EDTA依赖性血小板减少的干扰。
  参考文献:
  [1]张昌峰,朱俊.浅析EDTA依赖性假性血小板减少症病因[J].安徽医药,2009,13(3):302.
  [2]叶应妩,王毓三,申子瑜,主编.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社,2006:136-143.
  [3]Onder O,Weinstcin A,Loyer LW.Pseudothrombocytopenia caused by platelet agglutinins that ale reactive in blood anticoagulated with chelating ageats[J].Blood,1980,56:177-182.
  [4]龙聪,郭辉,杨章元.42例EDTA依赖性血小板减少症患者的检测分析[J].海南医学,2012,23(15):100-101.
  编辑/肖慧

edta,肝素(五)
EDTA依赖性假性血小板减少症检测方法的探讨

  【摘要】 目的 探讨乙二胺四乙酸(EDTA)依赖性假性血小板减少症几种检测方法的可靠性。方法 对10例EDTA依赖性假性血小板减少症病例采用XE-2100血液分析仪, 观察不同条件(不加抗凝剂、EDTA、枸橼酸钠、肝素锂)在不同时间段测定血小板的变化。结果 5 min即刻检测, 各种抗凝剂血小板数值均正常。30 min后EDTA抗凝标本血小板数值明显下降。部分枸橼酸钠、肝素锂标本血小板数值也有不同程度下降。结论 对EDTA依赖性假性血小板减少症可采取仪器旁即刻检测方法, 而枸橼酸钠、肝素锂检测方法不可取。

  【关键词】 乙二胺四乙酸;血小板计数;血细胞分析;假性血小板减少症
  假性血小板减少是指血小板发生体外聚集而致血小板减少。由于血小板聚集成团, 使血细胞自动计数仪无法分辨血小板团与单个血小板, 致使检测的血小板计数较实际血小板数值低出许多, 导致临床误诊误治。据报道, 假性血小板减少与抗凝剂乙二胺四乙酸(EDTA)有明显相关性[1]。因为国际血液学标准化委员会(ICSH)1993年确定EDTA为血细胞分析的首选抗凝剂并广泛应用, 因此EDTA依赖性假性血小板减少症(ethylenediaminetetraacetic acid-dependent pseudo-thrombocytopenia, EDTA-PTCP)发生率明显增加。本研究旨在探讨不同抗凝剂不同时间段条件下, 纠正EDTA-PTCP血小板检测的最佳方法, 为减少该病误诊误治做出一点贡献。
  1 资料与方法
  1. 1 一般资料 患者标本来源于本院2005~2014年门诊与住院患者诊断EDTA依赖性假性血小板减少症的10例患者。其中男6例, 女4例, 发病年龄:20~75岁, 其中4例为门诊常规体检就诊, 3例原发性高血压, 1例冠心病, 1例左输尿管结石, 1例左肾癌术后。10例患者均为常规血细胞分析检查发现血小板明显减少, 但均无临床出血倾向。白细胞、血红蛋白、凝血指标均正常。经即刻采血及外周血涂片检查明确诊断为EDTA-PTCP。
  1. 2 仪器与试剂 Sysmex-2100型全自动血液分析仪及配套试剂和质控品。
  1. 3 方法 采患者静脉血, 分别置于无任何抗凝剂管、EDTA抗凝管、枸橼酸钠抗凝管、肝素锂抗凝管内, 分别于5、30、60、120 min用Sysmex-2100型分析仪检测血小板数值。
  1. 4 血涂片 EDTA抗凝血(30、120 min)、患者新鲜耳血涂片各1张自然晾干, 用瑞-姬氏染色, 显微镜观察血小板聚集情况。
  2 结果
  2. 1 不同时间, 4种方法测定血小板计数 5 min即刻仪器旁检测:不加抗凝剂组, EDTA组, 枸橼酸钠组, 肝素锂组均显示血小板计数正常。(30~120 min) EDTA组血小板均减少, 并且随时间延长血小板减少程度增加。例4在枸橼酸钠、肝素锂组30、60、120 min均出现血小板减少, 例6在枸橼酸钠组(60、120 min)出现血小板减少。例10在肝素锂组(30、60、120 min)出现血小板减少。见表1。
  2. 2 血涂片检查 所有病例新鲜耳血涂片均可见血小板散在或小簇状易见。EDTA 30 min时涂片可见体尾部血小板簇状聚集, 片尾部呈小片状聚集。120 min后涂片血小板在片尾部均可见大片状聚集。
  3 讨论
  文献报道EDTA-PTCP的发病率约为0.07%~0.21%[1], 且随着EDTA抗凝剂在血常规检查中的广泛应用, 发病率呈逐年上升趋势。EDTA-PTCP的发生原因可能与以下机制有关:抗体介导的血小板聚集;血小板卫星现象;抗磷脂抗体[2]等。已证实大多数假性血小板减少的患者抗血小板抗体作用靶点是GPIIb/IIIa[3]。正常情况下, 血小板膜抗原表位隐藏在血小板膜GPIIb的亚单位中, 而钙离子螯合剂改变GPIIb/IIIa的分子构象, 引起血小板膜糖蛋白的暴露及分子修饰, 进而被抗血小板抗体识别, 结合, 引起血小板聚集。
  据文献报道[4, 5], 初步怀疑EDTA-PTCP的患者, 许多医院喜欢换用枸橼酸盐抗凝剂或肝素抗凝剂重新检测。EDTA是最常见的钙离子螯合剂, 可以引起EDTA-PTCP。而其他弱的钙离子螯合剂抗凝剂如枸橼酸盐类也可以引起血小板体外聚集成团, 导致假性血小板减少。另外肝素能引起血小板聚集及肿胀, 在计数时, 由于其体积较大, 会被仪器误认为其他细胞而导致血小板减少。本研究20%的病例(每组2例)经枸橼酸盐、肝素抗凝后, 血小板数值均有不同程度的下降。与胡先泳等[6]报道相符。因此, 作者认为对于怀疑EDTA-PTCP患者, 不应更换枸橼酸盐或肝素类抗凝剂再次检测, 而应该用不加任何抗凝剂管的全血做仪器旁即刻检测, 则血小板数值比较准确。
  EDTA-PTCP可见于许多疾病[7-9], 如高血压、高血脂、糖尿病、自身免疫性疾病、肝病、肿瘤、脓毒血症, 随着病情控制, 血小板可逐渐恢复正常, 也可见于正常人。邝妙欢等[8]报道, 肿瘤患者中EDTA-PTCP发生与性别、合并常见病、肿瘤类型、治疗方式可能无关。本研究中10例EDTA-PTCP患者患有心脏病、肿瘤等疾病, 也有正常人, 同时无性别差异, 与上述报道相符。
  将EDTA-PTCP的血液制品输给受血者, 后者血小板仍可获得满意提升[10], 证明EDTA-PTCP的良性病程。因此, EDTA-PTCP本身无临床意义, 关键要尽早诊断, 将其与其他血小板减少进行鉴别, 避免不必要的检查与治疗。文献报道中对多例EDTA-PTCP患者行骨髓穿刺检查, 予血小板输注, 甚至予大剂量糖皮质激素冲击治疗, 增加患者的身心痛苦及经济负担。因此接诊一个血小板明显减少的患者, 应仔细询问病史及查体, 如皮肤有无瘀点、瘀斑, 有无临床出血表现, 临床表现与血小板减少程度是否相符等。如临床无出血表现, 而血小板减少明显者, 需要考虑EDTA-PTCP的诊断。   最后建议临床上对无任何出血倾向而血小板减少明显患者, 采取以下应对措施:①警惕EDTA-PTCP的发生, 避免临床误诊误治。②疑似EDTA-PTCP患者可在仪器旁, 即刻采血直接行血小板计数。不建议更换枸橼酸盐或肝素抗凝剂重复采血。③血常规做涂片染色, 加EDTA抗凝剂者可见片尾大量血小板聚集, 不加抗凝剂者可见血小板散在或小堆簇状存在。
  参考文献
  [1] Yoneyama A, Nakahara K, EDTA-dependent Pseudothrombocy-topenia-differentiation from true thrombocytopenia. Nippon Rinsho, 2003(61):569-575.
  [2] 威廉姆斯. 威廉姆斯血液学 .陈竺, 译. 第8版.北京:人民卫生出版社, 2011:1756.
  [3] Casonato A, Bertomoro A, Pontara E, et al. EDTA-dependent pseudothrombocytopenia caused by antibodies against the cytoadhesive receptor of platelet GPIIB-IIIA.J Clin pathol, 1994 (47):625.
  [4] 孟晓玲, 夏世军.不同抗凝剂对检测血小板的影响.临床误诊误治, 2007, 20(6):43.
  [5] 张辉.加强对乙二胺四乙酸依赖性血小板减少症的认识及对策.检验医学与临床, 2008, 5(5):316-317.
  [6] 胡先泳, 陈峻. EDTA依赖性假性血小板减少症血小板检测. 血栓与止血学, 2013, 19(5):227-232.
  [7] Bragani G, Bianconcinl G, Brogna R, et al. Pseudothrom-bocytopenia:Clincal comment on 37 cases. Minerva Med, 2001 (92):13-17.
  [8] 邝妙欢, 欧阳文婷, 林建华, 等.肿瘤患者EDTA依赖性假性血小板减少的临床分析.中华医学杂志, 2010, 90(44):3144-3146.
  [9] Nair SK, Shah R, Petko M, et al. pseudothrombocytopenia in cardiac surgical practice. Interact Cardiovasc Thorac Surg, 2007(6):565-566.
  [10] Sweeney JD, Holme S, Heaton WA, et al. pseudothrombocytopenia in plateletpheresis donors. Transfusion , 1995(35):46-50.
  [收稿日期:2014-05-06]

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